Introduction: despite the development of new methods, culture on solid medium is the gold standard for the diagnosis of tuberculosis. However, this method is associated with increased rates of contamination of cultures by spore-forming bacteria. These bacteria are generally sensitive to vancomycin and to a combinsation of vancomycin, colistin, nystatin, and trimethoprim (VCNT). The purpose of this study was to assess the effectiveness of VCNT-based selective Lowenstein-Jensen (LJ) medium in reducing contamination of cultures by spore-forming bacteria.
Methods: sputum samples, collected from the 120 TB and non-TB patients included in the study between October 2016 and May 2017, were decontaminated with the modified Petroff method. Decontamination pellets were inoculated onto conventional LJ media and selective VCNT-based LJ medium containing 10µg/ml vancomycin. Fifteen strains of spore-forming bacteria were inoculated onto the same media in order to assess their sensitivity to VCNT.
Results: the contamination of cultures on VCNT-based LJ medium containing 10µg/ml of vancomycin and LJ medium were 11.66% (14/120) and 39.16% (47/120) with p <0.0001, respectively. Sensitivity of spore-forming bacteria to VCNT decreased with the increasing of culture incubation time.
Conclusion: VCNT-based selective LJ medium containing 10µg/ml vancomycin led to a significant reduction in the rate of culture contamination. This environment could contribute to improve the quality of mycobacterial cultures and thus bacteriological diagnosis of tuberculosis.
Introduction: le diagnostic de la tuberculose par culture sur milieu solide demeure la méthode de référence malgré le développement de nouvelles méthodes. Cependant, les performances de cette méthode sont entravées par des taux élevés de contamination des cultures dues à des bactéries sporulantes. Ces bactéries sont en général sensibles à la vancomycine et par conséquent à l´association vancomycine, colistine, nystatine et triméthoprime (VCNT). L´objectif de notre étude était donc d´évaluer l´efficacité d´un milieu de culture sélectif de Lowenstein-Jensen (LJ) à base de VCNT pour réduire les contaminations de culture.
Méthodes: des expectorations collectées chez 120 patients tuberculeux et non tuberculeux inclus entre Octobre 2016 et Mai 2017 ont été décontaminées par la méthode modifiée de Petroff. Les culots de décontamination ont été inoculés sur les milieux LJ ordinaires (LJ-MO) et sélectif LJ-VCNT à 10µg/ml de vancomycine. Quinze souches de bactéries sporulantes ont été inoculées sur les mêmes types de milieux afin d´évaluer leur susceptibilité au VNCT.
Résultats: les contaminations des cultures sur le milieu LJ-VCNT à 10µg/ml de vancomycine et sur milieu LJ-MO étaient respectivement de 11,66% (14/120) et de 39,16% (47/120) avec p<0.0001. La susceptibilité des bactéries sporulantes au VCNT diminuait avec l´augmentation de la durée d´incubation des cultures.
Conclusion: le milieu sélectif de L-J VNCT à 10µg/ml de vancomycine a permis une réduction significative du taux de contamination des cultures. Ce milieu pourrait contribuer à l´amélioration de la qualité des cultures des mycobactéries et donc du diagnostic bactériologique de la tuberculose.
Keywords: Lowenstein-Jensen; Mycobacterium tuberculosis complex; colistin; contamination; nystatin; trimethoprim; vancomycin.
Copyright: Michel Kiréopori Gomgnimbou et al.